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镁离子对大鼠血管平滑肌细胞钙化相关因子表达的影响

【作者】 白亚玲 ; 徐金升 ; 靳晶晶 ; 张俊霞 ; 张胜雷 ; 崔立文 ; 张慧然

【关键词】 肌细胞 平滑肌 β-甘油磷酸

摘要】目的探讨镁离子对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化相关因子表达水平的影响。方法选择5周龄健康雄性SD大鼠6只。以组织贴壁法进行原代VSMCs培养,至3~5代时用于细胞实验。将VSMCs采用随机数字表法分为正常对照组、高磷组(加入10 mmol/Lβ-甘油磷酸)、镁干预组〔加入10 mmol/Lβ-甘油磷酸+3 mmol/L硫酸镁(Mg SO4)〕、2-氨基乙氧基二苯基硼酸(2-APB)干预组(10 mmol/Lβ-甘油磷酸+3 mmol/L Mg SO4+10-4μmol/L 2-APB)。采用邻甲酚酞络合酮比色法检测细胞培养14 d后钙化情况,酶联免疫吸附法检测细胞培养14 d后碱性磷酸酶(ALP)活性,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测0、3、6、10、14 d时细胞内基质G蛋白(MGP)mRNA和骨桥蛋白(OPN)mRNA的表达水平。结果细胞培养14 d后,4组钙水平比较,差异有统计学意义(F=409.800,P〈0.05);高磷组、2-APB干预组钙水平高于正常对照组和镁干预组(P〈0.05)。4组ALP活性比较,差异有统计学意义(F=490.901,P〈0.05);高磷组、2-APB干预组ALP活性高于正常对照组和镁干预组(P〈0.05)。培养14 d后,4组MGP mRNA和OPN mRNA的表达水平比较,差异有统计学意义(F=1 279.905、1 157.247,P〈0.05);镁干预组MGP mRNA和OPN mRNA的表达水平高于高磷组及2-APB干预组(P〈0.05)。动态观察MGP mRNA和OPN mRNA的表达变化,结果显示在培养第3天时,高磷组MGP mRNA和OPN mRNA表达水平均降低(P〈0.05),并随着时间的延长呈下降趋势;镁干预组MGP mRNA和OPN mRNA表达水平均升高(P〈0.05),并随着时间的延长呈上升趋势。结论高浓度镁离子在抑制VSMCs钙化过程中可上调MGP及OPN的表达,并呈一定时间依赖性,为临床进一步研究提供了参考依据。

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