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1,25 (OH)_2D_3对人系膜细胞增殖及PI3K/Akt信号通路的影响

【作者】 唐玉玲 ; 张春江 ; 马莉 ; 贾林 ; 杨锐 ; 杨晓萍

【关键词】 骨化三醇 磷酸肌醇3-激酶类 Akt 肾小球系膜细胞 细胞增殖

摘要】目的观察1,25-二羟维生素D_3〔1,25(OH)_2D_3〕对人系膜细胞(HMC)增殖及Akt、mTOR表达的影响,探讨PI3K/Akt信号通路在1,25(OH)_2D_3对HMC增殖调控中的作用。方法体外培养HMC,取传代培养至第3~7代细胞分为4组:正常对照组(N组)、1,25(OH)_2D_3组(10-8mol/L,VD组)、PI3K抑制剂干预组(LY294002 2μg/ml,LY组),LY294002(2μg/ml)联合1,25(OH)_2D_3组(10-8mol/L)组(LY+VD组),干预48 h,倒置相差显微镜观察各组细胞生长,CCK-8法检测各组细胞增殖,流式细胞术检测各组细胞周期时相分布,Western blotting检测各组Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR表达的情况。结果各实验组吸光度值(A值)比较,差异有统计学意义(F=281.641,P〈0.01),其中VD组、LY组和LY+VD组A值均低于N组,LY+VD组A值均分别低于VD组和LY组,差异均有统计学意义(P〈0.01)。各实验组G_2/M期比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。各实验组G_1期、S期和PI比较,差异均有统计学意义(P〈0.05);其中VD组、LY组和LY+VD组G_1期均高于N组,S期和PI均低于N组,LY+VD组G1期均高于VD组,S期和PI均低于VD组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。各实验组Akt/β-actin、mTOR/β-actin灰度值比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。各实验组p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR灰度值比较,差异有统计学意义(P〈0.05);其中VD组、LY组和LY+VD组p-Akt/Akt、p-nmTOR/mTOR灰度值均低于N组,LY+VD组p-Akt/Akt、p-nmTOR/mTOR灰度值均低于VD组和LY组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论1,25-(OH)_2D_3可通过PI3K/Akt信号通路抑制体外培养HMC的增殖。

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