【摘要】目的 探索温阳利水方水提物对脾肾阳虚特发性膜性肾病(IMN)患者血清致小鼠足细胞损伤的保护作用机制.方法 2015年2-3月,选取在广州中医药大学第一附属医院肾病科住院,首次肾穿刺活检确诊为IMN、血清抗M型磷脂酶A2受体(anti-PLA2R)阳性、脾肾阳虚的患者28例,采集清晨空腹静脉血.同时间段,采集健康志愿者30例清晨空腹静脉血.CCK-8试剂盒检测不同浓度(5％、7.5％、10％)脾肾阳虚IMN患者血清对体外培养小鼠永生化足细胞增殖能力的影响,构建脾肾阳虚IMN血清损伤足细胞体外模型.根据CCK-8检测结果,设置正常对照组、模型组、2 mg/ml温阳利水方水提物组、4 mg/ml温阳利水方水提物组和8 mg/ml温阳利水方水提物组共5组,依次子10％健康志愿者血清+RPMI-1640培养基、10％脾肾阳虚IMN患者血清+RPMI-1640培养基、10％脾肾阳虚IMN患者血清+RPMI-1640培养基+2 mg/ml温阳利水方水提物、10％脾肾阳虚IMN患者血清+RPMI-1640培养基+4mg/ml温阳利水方水提物、10％脾肾阳虚IMN患者血清+RPMI-1640培养基+8 mg/ml温阳利水方水提物,分别孵育24h和48 h.通过细胞免疫荧光观察足细胞骨架蛋白F-actin、qRT-PCR检测Caspase-3 mRNA.结果 RPMI-1640培养基组和RPMI-1640培养基加温阳利水方水提物组OD值比较,差异无统计学意义(t=1.937,P＞0.05).20、40、60、80、100 mg/ml温阳利水方水提物组OD值低于0 mg/ml温阳利水方水提物组(P＜0.05).10％ IMN血清组OD值低于对照组、5％ IMN血清组、7.5％ IMN血清组(P＜0.05).10％ IMN患者血清,可破坏足细胞骨架蛋白结构,F-actin表达减少,与细胞轴方向不一致,部分断裂,排列紊乱,细胞回缩.孵育24h和48 h后,与模型组相比,温阳利水方水提物组F-actin表达增多,纤维断裂和排列紊乱情况均有所改善.孵育24h,模型组Caspase-3 mRNA高于正常对照组(P＜0.05).孵育48 h,模型组Caspase-3 mRNA高于正常对照组、2 mg/ml温阳利水方水提物组、8 mg/ml温阳利水方水提物组(P＜0.05);孵育48 h,8 mg/ml温阳利水方水提物组Caspase-3 mRNA低于2、4 mg/ml温阳利水方水提物组(P＜0.05).结论 温阳利水方水提物可改善脾肾阳虚IMN患者血清致小鼠足细胞骨架蛋白F-actin重排,可能通过抑制Caspase-3mRNA的表达,发挥抗凋亡效应.