大鼠远端肺动脉平滑肌细胞原代培养及其生物学特性和功能
【作者】
廖运学
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王昌明
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蒋明
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马礼兵
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徐青
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陈峰
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吕倩
【关键词】
肌细胞 平滑肌
肺动脉
大
【摘要】目的采用组织块贴壁法体外培养原代大鼠远端肺动脉平滑肌细胞(PASMCs),探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠与正常大鼠远端PASMCs的生物学特性及功能的异同。方法 SPF级SD雄性大鼠12只,按随机数字表法分为2组:对照组大鼠第1、14天经气道内注入0.9%氯化钠溶液,无香烟烟雾暴露。COPD模型组大鼠于实验第1、14天经气道内注入脂多糖(LPS)溶液,200μg/次,香烟烟雾暴露1 h/d,共8周。模型建立后,组织块贴壁法提取并原代培养各组大鼠远端PASMCs。倒置相差显微镜下观察细胞形态及生长特点;细胞免疫组化染色、透射电镜鉴定PASMCs;CCK-8和细胞荧光流式细胞仪检测各组细胞增殖情况。结果倒置相差显微镜下PASMCs为长梭形或鱼尾状,为典型的"峰-谷"样生长;细胞免疫组化染色、透射电镜鉴定所培养的细胞97%以上为PASMCs。COPD模型组PASMCs吸光度(1.079±0.119)高于对照组(0.871±0.041)(t=4.039,P〈0.05)。COPD模型组PASMCs增殖(1.315±0.203)强于对照组(1.023±0.057)(t=3.387,P〈0.05)。结论对照组与COPD模型组原代培养的PASMCs形态学相似,但生物学特性不同,功能亦存在差异。
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