Rad对心肌营养素1诱导心肌细胞肥大作用的实验研究
【作者】
耿召华
[2] ;
牛丽丽
[3] ;
刘玉峰
[1]
【关键词】
肥大
肌细胞 心脏
Rad
心肌营养素1
腺病毒
【摘要】目的探讨小G蛋白Rad对心肌营养素1(CT-1)诱导心肌细胞肥大作用的影响。方法 2011年6月—2013年3月,选取新生健康雄性SD乳鼠60只。构建载有Rad基因的腺病毒载体(Ad-Rad)、含有编码绿色荧光蛋白基因的空白腺病毒载体(Ad-GFP)。取乳鼠心脏并剪碎,进行心肌细胞原代培养。采用随机数字表法将提取的原代心肌细胞平均分为6组,即空白对照组〔转染磷酸盐缓冲液(PBS),刺激物为PBS〕、Ad-GFP组(转染Ad-GFP,刺激物为PBS)、Ad-Rad组(转染Ad-Rad,刺激物为PBS)、CT-1对照组(转染PBS,刺激物为CT-1)、Ad-GFP+CT-1组(转染Ad-GFP,刺激物为CT-1)、Ad-Rad+CT-1组(转染Ad-Rad,刺激物为CT-1)。转染腺病毒载体48 h后,采用流式细胞仪检测腺病毒载体转染率,并采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测Rad、心房钠因子(ANF)、β肌球蛋白重链(β-MHC)mRNA表达水平,Western blotting法检测Rad表达水平。结果腺病毒载体转染率为95.51%。Ad-Rad组Rad mRNA表达水平高于空白对照组、Ad-GFP组、CT-1对照组、Ad-GFP+CT-1组(P〈0.05);Ad-Rad+CT-1组Rad mRNA表达水平高于空白对照组、Ad-GFP组、CT-1对照组、Ad-GFP+CT-1组(P〈0.05)。CT-1对照组、Ad-GFP+CT-1组ANF mRNA表达水平高于空白对照组、Ad-GFP组、Ad-Rad组(P〈0.05);Ad-Rad+CT-1组ANF mRNA表达水平低于空白对照组、Ad-GFP组、Ad-Rad组、CT-1对照组、Ad-GFP+CT-1组(P〈0.05)。CT-1对照组、Ad-GFP+CT-1组β-MHC mRNA表达水平高于空白对照组、Ad-GFP组、Ad-Rad组(P〈0.05);Ad-Rad+CT-1组β-MHC mRNA表达水平低于CT-1对照组、Ad-GFP+CT-1组(P〈0.05)。Ad-Rad组Rad表达水平高于空白对照组、Ad-GFP组、CT-1对照组、Ad-GFP+CT-1组(P〈0.05);Ad-Rad+CT-1组Rad表达水平高于空白对照组、Ad-GFP组、CT-1对照组、Ad-GFP+CT-1组(P〈0.05)。结论 Rad具有负性调节CT-1诱导心肌细胞肥大的作用。
上一篇:促性腺激素释放激素类似物对特发性中枢性性早熟女童体质指数及骨代谢标志物水平的影响
下一篇:最后一页