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肺结核患者髓源性抑制细胞水平变化及其对T淋巴细胞增殖的影响研究简

【作者】 张涛 ; 葛成群

【关键词】 结核 肺 结核分枝杆菌 髓源性抑制细胞 精氨酸 一氧化氮

摘要】目的 探讨治疗前后肺结核(PTB)患者髓源性抑制细胞(MDSC)水平变化,分析MDSC对T淋巴细胞增殖的影响及其作用机制。方法 选取2011年1月—2014年1月于临沂市人民医院诊断为活动性PTB患者30例,痰液涂片镜检结核分枝杆菌(MTB)阳性和结核菌素皮肤试验阳性(TST+)的活动性PTB患者家属(接触PTB患者)12例,同期经本院结核内科检查为非结核病的健康对照者15例,同期本院痰液涂片镜检MTB阴性的肺部感染疾病患者7例。活动性PTB患者和接触PTB患者给予6个月的抗PTB治疗。取活动性PTB患者、接触PTB患者和健康对照者外周血制备单核细胞(PBMC),取活动性PTB患者和肺部感染疾病患者肺部灌洗液制备支气管肺泡细胞(BALC),采用流式细胞仪进行流式分选,记录MDSC在PBMC和BALC中的比例。同样方法对治疗结束的活动性PTB患者、治愈PTB患者和康复PTB患者检测MDSC在PBMC中的比例。从健康对照者分离的PBMC用CFSE活细胞荧光染色剂染色(CFSE-PBMC),从活动性PTB患者的PBMC中分离CD11b+CD14-MDSC,将不含MDSC的PBMC经丝裂霉素C作用后培养。以2×105个CFSE-PBMC为反应细胞,2×105个不含MDSC的PBMC和MDSC以不同比例(1∶0、1∶2、1∶4、1∶8)混合作为刺激细胞共培养,测定CD3+T淋巴细胞的CFSE信号强度。检测活动性PTB患者和健康对照者血清L-精氨酸、一氧化氮(NO)、鸟氨酸水平。结果 活动性PTB患者、接触PTB患者、健康对照者PBMC中MDSC比例分别为0.338(0.274,0.399)、0.115(0.073,0.201)和0.042(0.031,0.103),差异有统计学意义(H=16.450,P<0.001);其中活动性PTB患者PBMC中MDSC比例高于接触PTB患者、健康对照者(P<0.001)。活动性PTB患者BALC中MDSC比例为0.425(0.219,0.483),高于肺部感染疾病患者的0.031(0.011,0.100)(Z=9.675,P=0.004)。PBMC与MDSC分别以1∶0、1∶2、1∶4、1∶8混合后,CD3+T淋巴细胞增殖率分别为0.874(0.761,0.9

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